產品名稱：T-2毒素免疫親和柱
產品品牌：HPSW
產品貨號：06996-2530
產品規格：3ml

【概要】
T-2毒素是單端孢霉素類中的主要毒素之一，是三線鐮刀菌、擬技孢鐮刀菌、梨孢鐮刀菌等產生的有毒代謝產物，屬鐮刀菌毒素類。本病發生的主要原因是動物采食了受T-2毒素污染的玉米、麥類等飼料。在生產中，T-2毒素中毒以豬最為多見，其次是家禽，反芻動物發生較少。
【適用范圍及性能】
用于定性、定量檢測谷物、酒類等食品和飼料等樣本中的玉米赤霉烯酮時的樣品前處理。
柱容量：≥1500ng
回收率：≥90%
 
【試驗原理】
本產品的測定的基礎是抗原抗體反應，T-2 toxin單克隆抗體連接在柱內凝膠上，樣品中的T-2 toxin經過提取、過濾、稀釋，然后將樣品提取液緩慢的通過T-2 toxin免疫親和層析柱，在免疫親和柱內，T-2 toxin與抗體結合，之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結合的其他物質。用甲醇洗脫玉米赤T-2 toxin，然后注入到分析儀器中用于檢測。
 
【包裝組成】
25支/盒，3mL柱管/支
產品說明書1份
 
【需要而未提供的設備及試劑】
設備：
┅┅高速均質器或組織勻漿機
┅┅粉碎機
┅┅200ml/50ml量筒
┅┅天平：感量0.1g
┅┅微量移液器：單道 100ml～1000ml
┅┅槽紋濾紙（折疊快速定性或定量濾紙）
┅┅玻璃微纖維濾紙（1.5mm孔徑）
┅┅50ml漏斗
┅┅一次性玻璃試管
┅┅泵流操作架（包括空氣泵，不同容積的玻璃注射器等）
試劑：
┅┅甲醇(CH3OH):色譜純。
┅┅乙腈(CH3CN):色譜純。
┅┅ 甲苯(C6H5CH3):色譜純。
┅┅-二甲基氨基吡啶。
┅┅-蒽腈(1-anthroylnitrile,1-AN)。
┅┅蒸餾水或去離子水
┅┅pH7.0磷酸鹽緩沖溶液（PBS緩沖液）：稱取8.0g氯化鈉，1.2g磷酸氫二鈉，0.2g磷酸二氫鉀，0.2g氯化鉀，用990mL純水溶解，然后用濃鹽酸調節pH值至7.0，最后用純水稀釋至1000mL
 
【試劑配制】
樣品提取液：配制甲醇-水（8：2）溶液作為樣品提取液
4-二甲基氨基吡啶溶液:準確稱取0.0325g,4-二甲基氨基吡啶于100mL容量瓶中,用甲苯定容
至刻度
-蒽腈溶液:準確稱取0.030g1-蒽腈于100mL容量瓶中,
甲苯定容至刻度
【樣本處理步驟】
提取
糧食及糧食制品
將樣品研磨,硬質的糧食等用高速粉碎機磨細并通過試驗篩。稱取25.0g(精確到0.1g)過篩樣品于容量瓶中,用提取液定容至100mL,轉移至均質杯中,以均質器高速攪拌提取2min,定量濾紙過濾。
移取10.0mL濾液加入40mL水稀釋混勻,經玻璃纖維濾紙過濾至濾液澄清,濾液備用。
醬油、醋、醬及醬制品
稱取25.0g(精確到0.1g)混勻的試樣,用甲醇定容至50.0mL,超聲提取10min,定量濾紙過濾。
移取10.0mL濾液加入40mL水稀釋混勻,經玻璃纖維濾紙過濾至濾液澄清,濾液備用。
酒類
取脫氣酒類試樣(含二氧化碳的酒類使用前先置于4℃冰箱冷藏30min,過濾或超聲脫氣)或其他不含二氧化碳的酒類試樣20.0g(精確到0.1g)于50mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,搖勻,定量濾紙過濾。移取10.0mL濾液加入40mL水稀釋,經玻璃纖維濾紙過濾至濾液澄清,濾液備用。
凈化和洗脫
將免疫親和柱連接于玻璃注射器下,準確移取10.0mL 上述的提取濾液,注入玻璃注射器中。 將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約1 滴/s的流速緩慢通過免疫親和柱,直至空氣進入親和柱中。用10mL水淋洗親和柱,流速為1滴/s-2滴/s,直至空氣進入親和柱中,棄去全部流出液,抽干小柱。準確加入1.0mL甲醇洗脫,流速約為1滴/s,收集洗脫液。
衍生
標準工作液的衍生:取不同濃度的標準工作液各1mL,在50℃ 下用氮氣吹干,加入50μL，4-二甲基氨基吡啶溶液和50μL，1-蒽腈溶液,在渦旋混合器上混勻1min,50℃反應15min,在冰水中冷卻10min后取出,50℃下氮氣吹干,用1.0mL流動相溶解,待HPLC測定。
樣品的衍生:將5.2中洗脫液在50℃下用氮氣吹干,按上述步驟進行
【注意事項】
┅┅T-2 toxin危害很大，應戴手套操作。
┅┅不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
 
【貯藏條件及保存期】
貯藏條件：親和柱可于常溫保存，2-8℃儲存可延長有效期，不可凍存
保存期：該產品有效期為12個月。